Constituyen una familia de bastones gram negativos capaces de crecer en condiciones aerobias o anaerobias. Se encuentran normalmente formando parte de la flora del intestino de los vertebrados. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos. Son oxidasa negativo (excepto Plesiomonas, que es oxidasa positivo), es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa.

     Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones aeróbicas.Muchos géneros tienen un flagelo que sirve para desplazarse, aunque algunos géneros no son móviles. No forman esporas, algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas y son organismos catalasa positivos. Son quimioheterótrofos, y necesitan para su crecimiento compuestos simples de carbono y nitrógeno, generalmente sólo con D-glucosa, aunque algunas requieren aminoácidos y vitaminas. La temperatura óptima de crecimiento es de entre 22 °C y 37 °C.

Clasificacion

Dominio:     Bacteria

Filo:             Proteobacteria

Clase:          Gammaproteobacteria

Orden:         Enterobacteriales

Familia:       Enterobacteriaceae

Patogenia

La presencia de Enterobacteriaceae dentro del organismo es anormal y determina la aparición de infecciones, cuya gravedad depende del punto de entrada. Introducidas por los alimentos, provocan problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal, manifestada por diarreas y deshidratación. Ciertas especies provocan patologías específicas:

• La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea.
• La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la disentería bacila.
• La especie Escherichia coli enterotóxica es responsable de la gastroenteritis infantil.

Las Enterobacteriaceae incluyen a organismos que resultan patógenos para el ser humano como la Escherichia coli o la Salmonella, especialmente importantes en la mortalidad infantil en países en desarrollo y patógenos para las plantas como Erwinia, en la mayor parte de los casos causando infecciones oportunistas. Todos los bacilos de Enterobacteriaceae son resistentes a antimicrobianos comunes, tales como la penicilina, la meticilina y la clindamicina, entre otros.

Modos de identificación

Medios Selectivos

Los bacilos entéricos son resistentes frente a la inhibición por acción de ciertos colorantes bacteriostáticos (por ejemplo verde brillante) y de compuestos activos de superficies (por ejemplo las sales brillantes) a diferencia de lo que ocurre con la mayoría de las bacterias Gram Positivas. Los medios selectivos que contienen estas sustancias (Agar Mc Conkey y el Agar Desoxicolato) facilitan considerablemente el aislamiento de bacilos enterobicos a partir de cultivos fecales.

Pruebas Bioquimicas

Prueba TSI (Triple Sugar Iron ó Triple Azúcar Hierro)

El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad de producción de ácido y gas a partir de glucosa, sacarosa y lactosa en un único medio. Tambien permite la identificación de la producción de SH2.

Esta es una prueba específica para la identificación a nivel de género en la familia Enterobacteriaceae, con objetivo de diferenciar entre:

·         bacterias fermentadoras de la glucosa

·         bacterias fermentadoras de la lactosa

·         bacterias fermentadoras de sacarosa

·         bacterias aerogénicas

·         bacterias productoras de SH2 a partir de sustancias orgánicas que contengan azufre.

Prodedimiento:

Inocular los tubos de TSI con punta (alambre recto). Para eso introducir la punta hasta 3 a 5 mm. del fondo del tubo. Tras retirar el alambre del fondo, estriar el pico con un movimiento hacia uno y otro lado. Incubar a 35° durante 24 horas. Posteriormente se debe medir el pH de los cultivos.

Resultados:

·         Pico alcalino/fondo alcalino : no hay fermentación de azucares. Característica de bactrias no fermentadoras comoPseudomonas sp.

·         Pico alcalino/fondo ácido : Glucosa fermentada,lactosa ni sacarosa fermentadas. Shigella spp.

·         Pico alcalino/fondo negro : Glucosa fermentada, ni lactosa ni sacarosa fermentadas, producción de ácido sulfhídrico.Salmonela spp.

·         Pico ácido/fondo ácido: Glucosa y lactosa y/o sacarosa fermentadas. Puede producirse SH2 o no. Escherichia coli.

A estos resultados se les agrega el resultado de la producción de gas.

PRUEBAS BIOQUIMICAS

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MICROORGANISMO	FAMILIA	TINCION	FORMA	MOVILIDAD
PSEUDOMONA SPP.	ENTEROBACTER	GRAM -	BACILOS CORTOS, CURVADOS O RECTOS	POSEE FLAGELOS POLARES
SALMONELLA	ENTEROBACTER	GRAM -	BACILOS CORTOS	FLAGELOS PERÍTRICOS
SHIGUELLA SPP.	ENTEROBACTER	GRAM -	BASTONCILLOS	NO TIENE
ESCHERICHIA COLI	ENTEROBACTER	GRAM -	BACILOS CORTOS NO ESPORULADOS	FLAGELOS PERÍTRICOS
STAPHYLOCOCCUS AUREUS	MICROCACEAE	GRAM +	COCACEA	NO TIENE

Microorganismos utilizados en las Pruebas Bioquímicas

Resultados Experimentales

Grupo 1: Sebastián Leyton - Carlos Vera

Grupo 2: Yuri Gálvez - David Fuica

Grupo 3: Graciela Quintero - Carolina

Grupo 4: Carolina Iribarra - Jessica Pizarro

Oxidasa

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
PSEUDOMONA SPP.	+	+	+	+
SALMONELLA	+	+	+	+
SHIGUELLA SPP.	-	-	-	-
ESCHERICHIA COLI	+	+	+	+
STAPHYLOCOCCUS AUREUS	-	-	-	-

Catalasa

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
PSEUDOMONA SPP.	+	+	+	+
SALMONELLA	+	+	+	+
SHIGUELLA SPP.	-	+	-	+
ESCHERICHIA COLI	+	+	+	+
STAPHYLOCOCCUS AUREUS	+	+	+	+

Coagulasa

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
STAPHYLOCOCCUS AUREUS	+	+	+	+

Indol

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
ESCHERICHIA COLI	+	+	+	+

Agar Citrato

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
ESCHERICHIA COLI	-	-	-	-

Vogues-Proskauer

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
ESCHERICHIA COLI	-	-	-	-

Rojo Metilo

MICROORGANISMO	GRUPO 1	GRUPO 2	GRUPO 3	GRUPO 4
ESCHERICHIA COLI	+	+	+	+

Escherichia coli

La Escherichia coli, también conocida por la abreviación de su nombre, E. coli, es quizás el organismo procariota más estudiado por el ser humano. Se trata de una enterobacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo. Ésta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto del proceso digestivo, además de producir las vitaminas B y K. Es un bacilo que reacciona negativamente a la tinción de Gram (gramnegativo), es anaerobio facultativo, móvil por flagelos peritricos (que rodean su cuerpo), no forma esporas, es capaz de fermenta la glucosa y la lactosa y su prueba de IMVIC es ++--. Es una bacteria utilizada frecuentemente en experimentos de genética y biología molecular.

E. coli invasiva

Patogenia

Produce enfermedad gastrointestinal por su capacidad de invadir las células del epitelio intestinal, donde posteriormente se multiplican y causan daño.

Modo de identificación

Con ayuda del moco fecal , su sintomatología y su expediente. Pruebas de invasividad o prueba de Sereny

Medios selectivos

Se hace un cultino de heces , se utiliza técnica de ELISA .

E. coli enteroagregativa (ECEA)

Sólo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen fimbrias con las que aglutinan células en los cultivos de tejidos. Se unen a la mucosa intestinal causando diarrea acuosa sin fiebre. No son invasivas. Producen hemolisina y una enterotoxina ST similar a la de las enterotoxigénicas.

E. coli enteropatogena

Patogenia

Esta cepa causa diarrea.

Clasificacion

Enterobbacteria.

Modo de identificación

Pruebas de heces fecales y la técnica de ELISA.

E.coli enterotoxigenica

Patogenia

Causa diarrea, produce síntomas parecidos al cólera, produce un cuadro clínico en lactantes y preescolares.

  E. coli verotixigenica

Patogenia

Estas bacterias se llaman verotoxigénicas porque producen toxinas llamadas verocitotoxinas, una de cuyas propiedades es destruir las células de la línea celular llamada Vero. Estas toxinas pueden causar una serie de enfermedades en el ser humano que en orden creciente de gravedad van desde diarrea acuosa y colitis hemorrágica (CH), que es una inflamación del intestino grueso acompañada de diarrea sanguinolenta, hasta dolencias graves como púrpura trombótica trombocitopénica (PTT) y síndrome urémico hemolítico (SUH).

Medios selctivos

-Agar MacConkey

-Agar EMBA

Sintomatología

Colitis hemorrágica, luego síndrome urémico hemolítico, y por último púrpura trombocitopénica trombótica.

<>Shigella<><><>

Género bacteriano Gram negativas, cuya morfología se asemeja a un bastoncillo no móviles, no formadoras de esporas e incapaces de fermentar la lactosa, que puede ocasionar diarrea en los seres humanos. Fueron descubiertas hace 100 años por el científico japonés Kiyoshi Shiga, de quien tomó su nombre.

Se caracteriza por no fermentar la lactosa, ser inmóvil, no produce lisinadecarboxilasa y raramente produce gas a partir de hidratos de carbono.

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<>Clasificación Científica<><><>

Dominio:      Bacteriana

Filo:             Proteobacteria

Clase:         Gammaproteobacteria

Orden:         Enterobacteriales

Familia:       Enterobacteriaceae

Género:       Shigella

Especies:    boydii

                   dysenteriae

                   flexneri

                   sonnei

Patogenia

La infección por Shigella, típicamente comienza por contaminación fecal-oral. Dependiendo de la edad y la condición del hospedador, puede que solo sea suficiente alrededor de 200 organismos para causar una infección. La Shigella causa disentería, resultando en destrucción de las células epiteliales de lamucosa intestinal a nivel del ciego y el recto. Algunas cepas producen una endotoxina y la toxina Shiga, similar a la verotoxina de la E. coli O157:H7. Tanto la Shiga toxina, como la verotoxina están involucradas en el síndrome urémico hemolítico.

La Shigella invaden su hospedador penetrando las células epiteliales del intestino delgado. Usando un sistema de secreción específico, la bacteria inyecta una proteína llamada Ipa, en la célula intestinal, lo que subsecuentemente causa lisis de las membranas vacuolares. Utiliza un mecanismo que le provee de motilidad en la que se dispara una polimerización de actina en la célula intestinal, como un chorro de propulsión lo haría en un cohete, contagiando una célula después de la otra.

Diagnóstico de laboratorio

Muchas clases diferentes de enfermedades pueden ocasionar la diarrea y la diarrea sanguinolenta, y el tratamiento depende de qué germen la ocasiona. La determinación de qué Shigella es la causa de la enfermedad depende de pruebas de laboratorio que identifiquen la Shigella en las heces de una persona infectada. Estas pruebas no se realizan a veces a menos que se dé instrucciones al laboratorio específicamente de que busque el organismo. El laboratorio también puede realizar pruebas especiales que indiquen qué tipo de Shigella tiene la persona y qué anticuerpos, si es que alguno, serían los mejores para tratarla.

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Proteus

Clasificación Dominio: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Gammaproteobacteria Orden: Enterobacteriales Familia: Enterobacteriaceae Género: Proteus Epecies: mirabilis morganii penneri rettgeri vulgaris Proteus es un género de bacterias gramnegativas, que incluye patógenos responsables de muchas infecciones del tracto urinario. Las especies de Proteus normalmente no fermentanlactosa por razón de no tener una β galactosidasa, pero algunas se han mostrado capaces de hacerlo en el test TSI (Triple Sugar Iron en inglés, o "Triple Azúcar de Hierro"). Sonoxidasa-negativas y ureasa-positivas. Algunas especies son mótiles. Tienden a ser organismos pleomórficos, no esporulados ni capsulados y son productoras de fenilalanina desaminasa. Con la excepción de P. mirabilis, todos los Proteus reaccionan positivos con la prueba del indol. Hábitat Proteus es un género de bacterias ubicuas, residentes del tracto intestinal del hombre y algunos animales. Cultivo Crecen en medios corrientes y moderadamente selectivos a temperatura corporal de 37ºC. Crecen formando capas diseminadas por virtud de su gran motilidad. Existen variantes inmóviles que forman colonias lisas.Deben refrigerarse Morfología La estructura antigénica está compuesta por antígeno somático O, flagelar H y superficial K. El antígeno flagelar H contribuye a la capacidad invasora de las vías urinarias. La variante X del antígeno somático O está presente en algunas cepas de P. mirabilis. Otros grupos antigénicos definidos son el OX2, OX19 y OXK. El grupo OX19 (y a veces el grupo OX2) da reacciones cruzadas (aglutinación) en pacientes con Rickettsia prowazekii y ésa es la base de la prueba de Weil Félix. Patogenia Hay tres especies que causan infecciones oportunistas en el hombre: P. vulgaris, P. mirabilis, y P. penneri. Causan infecciones urinarias (más del 10% de complicaciones del tracto urinario incluyendo cálculos y lesiones celulares del epitelio renal), enteritis (especialmente en niños), abscesos hepáticos, meningitis, otitis media y neumonía con o sin empiema, entre otros. Es un frecuente invasor secundario de quemaduras y heridas, así como infecciones nosocomiales.      Todas las especies de Proteus son resistentes a la ampicilina, P. mirabilis es sensible a la penicilina. Factores de virulencia Flagelos, Fimbrias, Proteínas de membrana, Ureasa y Hemolisinas. No  producen toxinas solubles. Diagnostico Se hace un urocultivo que se puede sembrar en agares: -Agar maconkey :son colonias incoloras no fermentadoras de  lactosa.  -Agar Emb:no fermenta lactosa colonias incoloras. -Agar sangre: colonias lisas en forma de olas móviles , crecen en las placfas del cultivoureoasa (-). Tratamiento: Los antivioticos mas utilizados en esta infección son la Kanamicina,la gentamicina,las polimixinas,el clorafenicol,la cefalotina,y la estreptomicina.   Salmonella Bacilos gram negativos, anaerobios facultativos, con flagelos peritricos, no desarrollan capsulas ni esporas. Son bacterias móviles que producen el sulfuro de hidrogenó (H2S). Fermentan glucosa, y no producen ureasa. Su incubación es ah 37 grados durante 24 horas. Genero y especie El 1er grupo incluye S. Typhi y S. Parathypi A, B (S.Schottmuelleri), y C (S. Hirschfeldii), la cual es patogénica sólo en humanos y comúnmente causa la Fiebre Entérica. El 2do grupo causa enfermedades casi exclusivamente en animales, hay 2 excepciones S. Dublín y S. Choleraesuis también causan enfermedades en humanos. El 3er grupo el cual tiene > 2000 serotipos; Se le ha designado S. Enteritidis que causa Gastroenteritis y es la causa del 85 % de las infecciones de Salmonella en EE.UU. PATOGENIA Se dan en 3 formas de salmonelosis clínicamente diferentes: ·        Fiebres entéricas septicémicas ·        Gastroenteritis aguda Durante los últimos días de la enfermedad se pueden producir hemorragias intestinales graves o perforación del intestino y causar una peritonitis. MODO DE IDENTIFICACION Diagnostico de Laboratorio Aislando este microorganismo a partir de de la sangre, heces, orina u otros órganos. Es aconsejable apoyarse en las pruebas serológicas y moleculares como ELISA y PCR ya que tienen la capacidad de detectar un pequeños numero de estos organismos.   Medios selectivos ·        Agar SS (salmonella-shigella) ·      Agar MacConkey ·        Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato)